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Jacson 公司最新产品

 

                      Alexa Fluor dye conjugates
                                  染色偶联物
新的偶联物是著名系列Alexa Fluor dyes。本产品用来替代原有的DyLight dyes系列产品的部分产品。所有的Alexa Fluor dyes产品使用与DyLight dyes相同的过滤型号产品用于激发和扩散。现提供Alexa Fluor 647，Alexa Fluor 594，和亮度很强的Alexa Fluor 488标记的所有亲和纯化抗体和其他蛋白偶联物。产品目录中标明的每一种Alexa Fluor dye 偶联物当前均有销售。

Alexa Fluor Dyes—最明亮的偶联物

用Alexa Fluor dyes标记的蛋白质偶联物产生的荧光强度超过了其他同光谱荧光标记蛋白。Alexa Fluor dyes荧光染料有多重颜色可选，且比其他染料光稳定性更好。

无与伦比的的荧光亮度
Alexa Fluor dye分子偶联蛋白分子，不需显著的自淬灭（self-quenching）即可产生很高荧光强度的偶联物。您可以得到亮度最好的偶联物，可用于成像，流式细胞计术以及其他以荧光标记为基础的应用。

Alexa Fluor Dyes—杰出的耐光性

光稳定性是Alexa Fluor染料偶联物最为重要的特点，它给予使用者有更多的时间进行图像采集。此外，Alexa Fluor染料偶联物具有良好的荧光亮度，在光谱上有广泛的备选染料。通过Alexa Fluor染料及其染料偶联物您能得到良好的光稳定性。

光稳定性对比

相比传统荧光团（例如荧光素），Alexa Fluor 染料偶联物的光稳定性更好（图1和2）。

图1. Alexa Fluor 488 染料、Alexa Fluor 546染料，和著名的荧光素、Cy3荧光的光漂白（Photobleaching）速率对比。牛肺动脉内皮细胞（BPAEC）的细胞骨架用Alexa Fluor 488（上面部分）毒伞素 、小鼠单克隆抗a微管蛋白抗体和Alexa Fluor 546山羊抗小鼠IgG抗体标记，或者用（下面部分）荧光素毒伞素和抗微管蛋白抗体和商业化的Cy3山羊抗小鼠IgG抗体染色。伪彩色成像将在每间隔30秒拍照。(0, 30, 90, 和 210 秒的曝光)。图像采集使用了适于荧光素和罗丹明的带通滤光片（bandpass filter）。




图2.光漂白作用弱，信号可持续。牛肺动脉内皮细胞使用荧光素标记的毒伞素（A）或Alexa Fluor 488毒伞素（B），这两种毒伞素都标记纤丝状肌动蛋白。将标记后的细胞放置在有恒定光照的显微镜下，30秒内每秒钟取像一次。在此光照条件下，荧光素图像被光漂白后只剩初始值的20%，然而Alexa Fluor 488毒伞素的荧光强度维持在初始值。

                  Anti-Sheep IgG, Light Chain Specific

     for Protein Detection on Western Blots after Immunoprecipitation
                 抗绵羊IgG，特异性轻链，用于免疫沉淀反应后的免疫印迹蛋白质检测

当标记的二抗特异性针对IgG重链和轻链（ 例如抗IgG (H+L)）且被用于免疫沉淀后的蛋白印记实验中，可以发现有两条较粗的条带，分别对应于沉淀下来的一抗的重链(50 kDa)和轻链(25 kDa)。这些条带通常会掩盖分子量在50 kDa或25 kDa左右的目的蛋白的检测。然而，当用轻链特异性标记的抗IgG抗体（标记二抗）检测时，二抗仅能与膜上的轻链条带，或者一抗的轻链相结合。由于排除了免疫共沉淀的IgG在50kDa条带处的干扰，轻链特异性标记的抗IgG抗体与未标记的一抗共同孵育后就可以检测到50 kDa左右的目的蛋白。同理，Fc段特异性标记的抗IgG抗体与未标记的一抗共同孵育后就可以检测到25 kDa左右的目的蛋白。

图A和B，SDS-PAGE和Western Blots结果。还原的且SDS变性的小鼠IgG的重链 (50kDa)和轻链(25kDa)，通过SDS-电泳分离，然后使用免疫印迹检测。免疫印迹使用了HRP-山羊抗小鼠IgG（H+L）(A)和HRP-山羊抗小鼠IgG，特异性LC（B）。使用抗IgG (H+L) (A)时，轻链和重链条段都被检测出来的。然而，如果使用LC特异性抗IgG（B），即使上过量的IgG，重链条段也不能被检测出来。

轻链特异性抗IgG抗体经过了血清彻底吸收以最小化种属间免疫球蛋白的交叉反应。

单克隆鼠抗山羊IgG（轻链特异性）抗体是轻链特异性抗IgG抗体家族的最新成员，适用于免疫沉淀后的Western Blotting检测。

虽然这些抗体与天然IgG轻链之间的反应性很强，但有些抗体与还原和变性的轻链之间的反应可能会较弱。因此，这些抗体不推荐用于对检测灵敏度要求较高的和定量的Western Blots，因为此时检测的都是还原和变性的轻链。